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　　植物組織樣本的處理

　　一、勻漿介質(zhì)

　　殷采用0.05 mol/ Tris-HCl,pH 7.4 磷酸鹽緩沖液(PBS),客戶可根據(jù)樣本及測定指標的情況自行設定濃度,目的是保持樣本的等滲環(huán)境。

　　二、組織勻漿的制備

　　取組織塊(0.2g~0.5g)少可到5~10mg在冰冷的PBS中漂洗，濾紙拭干，準確稱重，放入5ml的勻漿管中。

　　按重量(g):體積(ml)=1:4的比例加入4倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中，冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。

　　3、勻漿的方式:手工勻漿，機器勻漿。

　�、� 手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手將搗桿垂直插入套管中，上下轉(zhuǎn)動研磨數(shù)十次(6 ~8分鐘)，充分研碎，制成20%的勻漿液。

　�、� 機器勻漿:用組織搗碎機10000~15000 轉(zhuǎn)/分 上下研磨制成20%組織勻漿，也可用內(nèi)切式組織勻漿機制備(勻漿時間10/次，間隙30，連續(xù)3~5次，在冰水中進行,可適當延長勻漿時間)鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片(直接涂片、染色均可以)，顯微鏡下觀察細胞是否破碎，若沒有則可延長勻漿時間。

　　4、將制備好的20%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機4000轉(zhuǎn)/分左右,離心10~15分鐘，取上清液進行測定。

　　三、樣本保存:

　　植物組織樣本暫時不測定，可立即低溫凍存，溫度越低越好，中間如不反復凍融，-20℃以下可保存三個月,-70℃以下可保存六個月。

　　制備好的勻漿液建議不要凍存,當天進行測定,如放置時間過長相關酶活會有所下降,部分指標4℃可存放3~5天(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,總蛋白測定可存5~7天等)。

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原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司